Ифа гепатит с

Posted by

ИФА на вирусный гепатит



Оставьте комментарий 2,394

Для выявления вирусных гепатитов в организме медицина широко применяет метод иммуноферментного анализа, основанного на выявлении концентрации и вида антигенов с помощью антител и ферментов. Проводится поэтапно, путем лабораторных исследований, с высокой точностью показаний. В зависимости от количества и класса антител изменяется цвет и концентрация фермента, который использует ИФА и, согласно этому, врач диагностирует заболевание.

Что такое ИФА?

Наличие вирусного гепатита в организме больного определяют с помощью серологического метода анализа крови на присутствие вируса HCV и маркеров (тел и антител), на него указывающих. Иммуноферментный анализ (ИФА) исследует разные вирусы, низкомолекулярные соединения, макромолекулы, их качественный и количественный показатели, используя проявление реакции на их антигены. Для этого применяют фермент, как метку для сигнальной регистрации. Его все шире используют в медицине, поскольку ИФА четко находит строго определенные антигены, не путая их с другими, имеет высокую чувствительность к наличию инвазии при вирусном гепатите.

Анализ нужно сдавать натощак.

Минус такой диагностики — невозможность выявить причину болезни, так как метод указывает только на реакцию иммунной системы организма. На результаты анализа влияет вакцинация, проведенная ранее. За 8 часов перед проведением анализа рекомендуется воздержаться от приема пищи, никотина, алкоголя. Основа ИФА теста — ферментативная и иммунная реакция организма на вирус. Биологические молекулы связываются с клеткой и ее элементами, микроорганизмами, обнаруживают вирус, далее работают ферменты, которые позволяют выразить иммунную реакцию в видимый и измеримый параметр.



Показания к анализу

Вирусные гепатиты в организме могут стать причиной возникновения онкологических заболеваний и цирроза печени. Важность своевременной диагностики неоспорима. Первичным способом диагностики является тест ИФА, который с высокой точностью определяет наличие HCV вируса (IgM и IgG) и активность его микроэлементов. В обязательном порядке анализы на вирусный гепатит сдают:

  1. Люди с групп риска (наркозависимые, болеющие СПИДом, работники медицинских и правоохранительных учреждений).
  2. Люди с острой или хронической формой гепатита.
  3. Беременные и планирующие беременность женщины.

ИФА распознает болезнь на любой стадии. Результаты анализа, в среднем, готовы за 2 дня.

Критерии, что определяют важность анализа

ИФА тест определяет наличие антител класса IgG, IgM, IgA. При диагностике вирусного гепатита врач не обращает внимания на их тип, так как присутствие любого такого проявления вируса HCV уже указывает на острую или хроническую стадию протекания болезни. На ранних стадиях заболевания повышается уровень IgM (через 5 дней после заражения); на 15—20 день появляются IgG антитела и могут долгое время находиться в крови человека даже после излечения; IgA — появляется через 10—14 дней, снижается после лечения.

В случае, если IgG и IgA обнаруживаются после применения препаратов и их уровень остается в том же показателе — у носителя хроническая форма гепатита. Важным критерием теста будет четкое определение класса имеющихся антител и их количества. На основании этого можно знать не просто о наличие заболевания, но и стадию его развития. Обнаружение таких элементов в крови больного дает возможность назначить правильное и своевременное лечение для предотвращения более тяжелых последствий.

Как проводится?

Выделяют прямой и не прямой тест ИФА. Этапы прямого:


  1. Сбор биологического материала и размещение его в специальных лунках.
  2. В течение 15—30 мин. антигены прикрепляются к поверхности лунок.
  3. Добавление антител в лунки к найденному антигену. Оставляется все на 1—5 часов.
  4. Удаления неприкрепленных антигенов (выливание содержимого лунок).
  5. Ополаскивание лунок специальным раствором.
  6. Добавления ферментного раствора в лунки. Оставляют на 30 мин.—1 час.
  7. Использование колориметрии (выявление цвета и концентрации окраса содержимого лунки, сопоставление с показателями, которые прямо пропорциональны с концентрацией вируса).

Использование для диагностики непрямого метода ИФА даст более точный результат.

Непрямой метод ИФА проходит при применении немеченных антител к найденным антигенам и впоследствии добавлении к ним меченных. Сначала берется кровь у пациента и разносится по лункам на 15—30 мин. (антитела фиксируются с лунками). Потом в них вносятся немеченные антитела на 1—5 часов (образуется связь антител с антигенами — иммунный комплекс). Далее не прикрепленные микроэлементы выливаются с лунок и промываются специальным раствором. На следующем этапе лаборант добавляет в лунки меченные микроэлементы на 15—30 мин. (при этом связываются немеченные с меченными с образованием комплекса «антитело-антитело-антиген»). Повторно удаляются лишние (незакрепленные) при сливании и промывке раствором. Далее вносится фермент, который меняет цвет за 5—30 мин. пребывания в лунках и данные окраса сверяются с данными показателей таблиц. Непрямой метод ИФА более точный.

Что показывает ИФА при анализе на вирусный гепатит?

Иммуноферментный анализ позволяет выявить наличие инфекции (вирусы гепатита всех видов, ВИЧ, герпес, сифилис, цитомегаловирус, корь, краснуху, вирус паротита, вирус Эпштейн-Барра), является маркером аутоиммунных заболеваний, раковых клеток. Указывает на нарушения репродуктивных функций (изменения уровня тестостерона, пролактина, эстрадиола и прогестерона), сбой работы щитовидной железы, инвазию гельминтами, хламидиями. Эффективен для выявления уреаплазмоза, коклюша, вируса Данге, вируса Западного Нила, Боррелии. Список определений высок, включает много наименований.

Подтверждение результатов

Определение антигена вируса HCV методом ИФА дает 98% точность. Его также используют для повторного тестирования биологического материала при нечетких предыдущих показателях. Наличие IgM антигенов не является показателем на гепатит острой формы и требует дополнительных исследований. При повторном проведении ИФА теста результаты совпадают на 90—100%. В случаях минимального расхождения как показатель принимается среднее значение. Для получения максимальной точности в показателях врачи советуют параллельно проводить биохимический анализ крови. Для проверки результатов после иммуноферментного анализа можно использовать другие способы диагностики.

Источник: http://infopechen.ru/gepatity/diagnostika/ifa-pri-virusnyh-gepatitah.html



Исследования на вирус гепатита С

Антитела к вирусу гепатита С ( суммарные)

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют

Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.

Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ. Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.

Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.

Антитела IgG к ВГС могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8-10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С суммарные антитела определяются постоянно. Поэтому для уточнения сроков инфицирования необходимо отдельно определить антитела класса IgM к ВГС.



Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.

Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования. Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест. Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.

Антитела к вирусу гепатита С JgM

Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.

Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.



Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)

Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.

В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.

Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.

Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.

Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менеевирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.

Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.

Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.

Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • дифференциация гепатита С от других форм гепатита;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом; определения стадии инфицированности новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Оглавление:

    Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)

    Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.

    

    Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 10^2 до 10^4 копий/мл – низкий; от 10^5 до 10^7 копий/мл – средний и выше 10^8 копий /мл – высокий.

    Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

    Генотипирование вируса гепатита С — определение генотипа

    Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС – 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.

    Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.

    При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а – в 33-50%. У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.

    Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном–альфа являются:

    
  • повышение уровня трансаминаз;
  • наличие РНК ВГС в крови;
  • генотип 1 ВГС;
  • высокий уровень виремии в крови;
  • гистологические изменения в печени: фиброз, умеренные или выраженные воспалительные явления.
  • При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами – в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% — с другими субтипами ВГС.

    Источник: http://www.gepatit.ru/gepatit-c-analysis/

    ИФА на гепатит С

    ИФА гепатит С определяет эффективно, это один из методов диагностики заболевания, основанный на взаимодействии антигенов и антител. Иммунохимическая реакция путем ИФА (иммуноферментного анализа) позволяет выявить в организме анти-HCV антитела. Метод дает возможность дифференциальным путем диагностировать у человека гепатит С, определить стадию развития заболевания, спрогнозировать его течение. Выявление специфических серологических маркеров позволяет также подобрать эффективное противовирусное лечение патологии.

    Особенности метода

    Анализ на выявление в крови человека антител к вирусу гепатита типа C проводится путем присоединения к молекуле иммуноглобулина чужеродного микроорганизма (антигена). Присоединенный энзимный фермент играет роль своеобразной метки. Она позволяет проследить за иммунохимической реакцией, а также одним из ее компонентов.

    В качестве компонентов иммуноферментного анализа могут выступать:

    
    • антитела;
    • антитела, помеченные специальным ферментом;
    • антигены;
    • субстраты ферментов;
    • индикаторные красители.

    При попадании в организм человека вредоносных чужеродных микроорганизмов защитные силы начинают вырабатывать иммуноглобулины (антитела). Впоследствии они воздействуют на антигены и нейтрализуют их. Такое взаимодействие приводит к образованию антитела-антигена, имеющего свои показатели количества и качества. Именно они свидетельствуют о наличии либо отсутствии в организме HCV-инфекции. В случае если результат иммуноферментного анализа положительный, имеет место вирус гепатита типа С.

    Современные технологии в медицине позволяют значительно сократить сроки выявления вируса гепатита, протекающего в острой форме. Благодаря диагностическим системам третьего поколения также представляется возможным повысить специфичность и чувствительность иммунохимической реакции.

    Основным исследуемым материалом при проведении ИФА выступает венозная кровь (в том числе донорская). По показаниям могут производить забор спинномозговой жидкости или околоплодных вод.

    Положительный результат метода ИФА на гепатит типа С не всегда свидетельствует о наличии вирусной инфекции в организме. В более чем 35 % случаев в крови вирусных антигенов не обнаруживается, что приводит к ложноположительному результату.

    Метод позволяет следить за количественными и качественными изменениями, разграничением острой и хронической формы гепатита С. Однако для определения активности патологического процесса он малоэффективен. Для более точного подтверждения наличия HCV-инфекции следует применять также другие методы диагностики патологии.

    

    Показания к проведению ИФА

    Метод выявления видовой и количественной концентрации чужеродных микроорганизмов (антигенов) при помощи иммуноглобулинов и ферментов проводится в несколько этапов. На основании изменения цвета и количественного показателя фермента врач может диагностировать у человека гепатит типа C.

    В большей степени заболеванию подвержены следующие категории людей:

    1. Пациенты, перенесшие хирургические вмешательства, а также заболевания внутренних органов и систем.
    2. ВИЧ-инфицированные (инфицированные вирусом иммунодефицита человека). Большой процент людей, входящих в эту группу, составляют наркозависимые люди.
    3. Медицинские работники.
    4. Сотрудники правоохранительных органов.
    5. Беременные женщины.

    Гепатиты вирусного происхождения нередко приводят к развитию онкологического заболевания (например, рака печени). Именно поэтому сдавать кровь на иммуноферментный анализ следует в первую очередь людям, входящим в основную группу риска, а также больным с острой либо хронической формой гепатита.

    По показаниям врач может назначить проведение метода ИФА пациентам, у которых диагностируется:

    • ИППП (инфекции, передающиесяполовым путём);
    • заболевания вирусной природы происхождения (папилломавирус, герпетическая инфекция, гепатит и т. д.);
    • аллергический характер патологии;
    • иммунодефицитное состояние;
    • онкология.

    Преимущества и недостатки

    ИФА гепатит С позволяет выявлять на ранней стадии, а также в бессимптомной и безжелтушной формах. Как и у любого метода диагностики, он имеет ряд преимуществ и недостатков.

    

    Среди положительных особенностей ИФА специалисты выделяют:

    1. Точность качественных и количественных показателей. Чувствительность метода превышает другие исследования на выявление гепатита в десятки раз.
    2. Значительное сокращение сроков выявления вирусной инфекции благодаря современным диагностическим системам.
    3. Невысокая цена по сравнению с другими исследованиями на выявление гепатита у человека.
    4. Возможность диагностирования заболевания печени на ранней стадии при отсутствии выраженных симптомов.
    5. Поэтапное проведение исследования с использованием автоматизированных процессов.

    Несмотря на высокую точность ИФА, более чем в 35 % случаев при положительном результате вирус гепатита у пациента не выявляется. Нередко тест не подтверждает патологию, что свидетельствует о сомнительном или отрицательном результате.

    На достоверность исследования в той или иной степени влияет:

    1. Прием лекарственных препаратов.
    2. Нарушения обменных процессов в организме.
    3. Наличие некоторых патологий хронического характера, способствующих активной выработке иммуноглобулинов.

    Учитывая недостатки результатов опыта инвитро методом ИФА, пациенту назначаются дополнительные исследования. Для достоверного обнаружения антител к вирусной инфекции гепатита С применяется метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) либо RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг).

    Что выявляет и как проводится исследование

    Анализ методом ИФА способен выявить широкий ряд заболеваний у человека.

    

    Помимо обнаружения антител гепатита всех видов, положительный результат теста может свидетельствовать о наличии в организме следующих патологий:

    • вируса иммунодефицита человека;
    • герпетической инфекции;
    • сифилиса;
    • ИППП (уреаплазмоза, хламидиоза и др.);
    • папилломавируса;
    • цитомегаловируса.

    Исследование также является своеобразным маркером по обнаружению злокачественных новообразований, генетических патологий, гормональных нарушений, а также сбоев в функционировании эндокринной системы.

    Подготовка к сдаче биологического материала на выявление вируса гепатита С подразумевает отказ от приема пищи и медикаментов за 12 часов до проведения исследования. Также необходимым условием является воздержание от употребления алкоголя, жирных, жареных и соленых блюд.

    Прямой метод ИФА

    Основные этапы при проведении прямого теста заключаются в следующем:

    1. Вначале лаборант производит забор крови из вены (либо другого биологического материала), а затем помещает ее в специальные емкости.
    2. Чужеродные микроорганизмы (антигены) в течение 20 минут начинают прикрепляться к ним.
    3. Специалист добавляет иммуноглобулины (антитела) к найденным антигенам для образования иммунной реакции. При этом компоненты оставляются на несколько часов.
    4. Неприкрепленные антигены удаляются путем выливания содержимого из емкостей.
    5. Материал ополаскивается раствором, а затем обрабатывается ферментами и оставляется на один час.
    6. Цвет и концентрация содержимого анализируются благодаря использованию колориметрии.

    Если количественный показатель содержимого превышает допустимые нормы, то это свидетельствует о наличии вируса гепатита С в организме человека.

    

    Непрямой метод ИФА

    Подразумевает взаимодействие непомеченных иммуноглобулинов с антигенами, к которым впоследствии присоединяют помеченные антитела.

    В начале у пациента берется кровь из вены. Затем биологический материал помещается в специальные емкости примерно на полчаса. При этом непомеченные антитела присоединяются к стенкам емкостей. Затем к ним добавляются помеченные антитела. В результате их взаимодействия образуется иммунный комплекс «антитело-антиген».

    По истечении 4 часов содержимое емкостей выливается, а неприкрепленные микроэлементы удаляются. Лаборант присоединяет помеченные антитела к уже образовавшемуся комплексу, при этом происходит иммунная реакция «антитело-антитело-антиген».

    После повторного удаления незакрепленных микроэлементов в емкость добавляется специальный фермент, меняющий цвет и количественные показатели содержимого. На основании полученного результата специалист сверяет данные и делает заключение.

    Расшифровка результатов

    При проведении ИФА внимание уделяется наличию либо отсутствию антител классов IgA, IgG и IgM. Количественные показатели этих антител сверяются с данными специальной таблицы.

    

    Согласно ей, расшифровка результатов сводится к следующему:

    1. Если все три типа показателей не определяются, у человека наблюдается полное выздоровление.
    2. При одновременном положительном результате по всем трем показателям, наблюдается острая форма вирусной инфекции.
    3. Если определяются антитела класса IgG, при этом остальные классы не выявлены, то у человека развился постинфекционный иммунитет.
    4. На хронический характер заболевания указывают положительные показатели антител классов IgG и IgA. При этом они остаются неизменными даже после медикаментозного лечения.
    5. При положительном выявлении всех трех типов антител может наблюдаться рецидив хронического характера гепатита.

    Согласно статистическим данным, уровень IgM начинает повышаться через несколько дней после попадания инфекции в организм, что свидетельствует о ранней стадии патологии. IgG антитела обычно проявляются через 2 недели после начала заболевания и находятся в крови на протяжении длительного периода времени (даже после выздоровления). Антитела IgA обнаруживаются через 2 недели, при этом после медикаментозной терапии их концентрация в организме снижается.

    Помните, что гепатит С ИФА положительный не всегда свидетельствует о наличии инфекции. Нередко тест считается ложноположительным, что требует повторной сдачи крови. В некоторых случаях пациенту назначают дополнительные исследования для более точного определения показателей крови.

    Основным критерием при проведении теста является точное выявление количественных и типовых показателей. Они позволяют определить не только наличие вируса, но и форму заболевания. Диагностика гепатита С при помощи современных методов позволит начать своевременную медикаментозную терапию и минимизировать негативные последствия.

    Источник: http://pechen1.ru/gepatit/c/ifa.html

    

    Особенности анализа крови с помощью метода ИФА

    Во многих случаях врачам необходимо правильно оценить, насколько хорошо и слаженно работают защитные функции организма пациента. Для точной диагностики различных заболеваний, патологий крови, выявления иммунодефицитов используется специальный анализ крови методом ИФА. Эта аббревиатура расшифровывается как иммуноферментный анализ.

    Суть метода ИФА

    Этот метод относится к числу иммунохимических реакций, которые основаны на взаимодействии антигенов и антител. К молекуле антитела химически присоединяют молекулу антигена-энзима. Фермент применяют в качестве метки, по которой следят за одним из компонентов реакции.

    Основными компонентами ИФА являются:

    • антиген;
    • антитело;
    • антитело, меченное ферментом;
    • субстрат фермента;
    • индикаторный краситель.

    Антитела или иммуноглобулины вырабатываются в тот момент, когда в организм попадают какие-то антигены или чужеродные микроорганизмы. Иммуноглобулины входят в контакт с антигенами и обезвреживают их. Связываясь с конкретным антигеном, иммуноглобулины образуют своеобразный комплект: антиген-антитело. У этого комплекта могут быть как количественные, так и качественные показатели. Именно их и определяет с высокой точностью метод ИФА.

    В некоторых случаях в качестве исследуемого материала берут спинномозговую жидкость или содержимое стекловидного тела. У беременных женщин исследуют околоплодные воды. Но чаще всего для исследования используется кровь пациента. Она берется из вены строго натощак.

    

    Как подготовиться к анализу?

    Перед сдачей анализа следует воздержаться от еды в течение 12 часов. Также в течение 2-3 дней перед анализом не надо есть жирную и жареную пищу, употреблять алкоголь.

    Физические нагрузки перед сдачей анализа и стрессы могут не лучшим образом повлиять на результат, поэтому желательно их исключить.

    Врач должен знать, не принимал ли пациент накануне каких-то лекарств. Женщинам необходимо сообщить доктору о фазе своего менструального цикла – это тоже имеет значение.

    Показания

    Врач может назначить сдачу этого анализа при подозрении на следующие заболевания:

    • вирусные заболевания – гепатит, герпес, цитомегаловирус и т.п.;
    • аллергические состояния;
    • заболевания, передающиеся половым путем – хламидиоз, сифилис, микоплазмоз и т.д.;
    • иммунодефицитные заболевания;
    • некоторые онкологические заболевания (например, рак печени).

    Также метод ИФА применятся для того, чтобы лечащий врач мог оценить, насколько эффективна назначенная пациенту терапия при лечении того или иного заболевания, каков уровень гормонов у больного. Он также входит в комплексное обследование пациента перед предстоящим оперативным вмешательством.

    

    Расшифровка некоторых показаний анализа ИФА:

    Время ожидания результатов зависит от того, какое именно заболевание необходимо диагностировать. Кроме этого, надо учитывать возможности лаборатории, в которой проводится исследование. Некоторые небольшие медицинские учреждения в целях экономии средств ждут, когда кровь сдадут несколько пациентов, чтобы одновременно использовать реактивы.

    Но даже с учетом всех вариантов, вы должны получить результаты не позднее чем через 10 дней после забора крови. А в самом быстром случае время ожидания составляет 1 день.

    Преимущества анализа

    К несомненным плюсам данного метода исследования крови относятся:

    • высокая точность показателей. ИФА превосходит другие методы по чувствительности враз;
    • высокая скорость проведения – выигрыш во времени получения результата повышается в 30 раз;
    • невысокая стоимость по сравнению с другими методами исследований;
    • возможность раннего диагностирования заболеваний и отслеживания динамики процесса болезни;
    • автоматизация всех этапов исследования;
    • высокая унификация.

    К недостаткам можно отнести то, что в отдельных случаях результаты бывают как ложноположительными, так и ложноотрицательными. На достоверность могут повлиять прием пациентом ряда лекарств, различные нарушения в обмене веществ больного и наличие некоторых хронических заболеваний (например, ревматоидный артрит), при которых идет активная выработка организмом антител.

    

    При взятии данного анализа у новорожденного ребенка достоверность также может нарушиться из-за присутствия в крови младенца антител матери.

    Метод ПЦР

    Для того чтобы перепроверить данные анализа ИФА, уточнить диагноз, пациенту предлагают слать анализ ПЦР. Это диагностика полимеразных цепных реакций. Благодаря данному анализу выявляется микроскопический фрагмент ДНК любого возбудителя болезни, например, вируса гепатита. Достоверность анализа составляет в большинстве случаев 100 %.

    Ряд хронических заболеваний с вялотекущим течением анализ ИФА не способен выявить, а методу ПЦР это вполне по силам. При помощи этого анализа выявляются такие заболевания, как мононуклеоз, вирусный гепатит, цитомегаловирус, клещевой энцефалит, различные инфекции, передающиеся половым путем, папилломавирус, кандидоз, ВИЧ.

    Материалом для исследования является кровь, а также моча, слюна, слизь, сперма, соскоб эпителия, внутрисуставные жидкости.

    Как подготовиться к анализу?

    Для того чтобы результат оказался верным, пациенту необходимо правильно подготовиться к сдаче анализа. Если на анализ берется венозная кровь, что за несколько часов до сдачи нельзя ни есть, ни пить. За несколько дней до анализа желательно исключить из своего рациона все жирные и жареные блюда и продукты, которые могут вызвать аллергическую реакцию. Следуют воздержаться от приема алкогольных напитков и курения.

    

    Также не менее, чем за 10 дней до дня диагностики следует прекратить принимать антибактериальные препараты. Если на анализ сдается моча, то перед сбором нельзя мочиться в течение примерно 3 часов. Моча собирается утром в строго стерильную баночку.

    Перед сдачей мазка женщинам не следует спринцеваться и применять какие-либо вагинальные свечи.

    Сдавать мазок на анализ надо до наступления месячных или спустя 4 дня после их окончания. Ответ пациент получает через сутки после сдачи анализа.

    Совет от гепатологов

    В 2012 году произошёл прорыв в лечении гепатита C. Были разработаны новые противовирусные препараты прямого действия, которые с вероятностью 97% полностью избавляют вас от заболевания. С этого момента гепатит С официально считается полностью излечимым заболеванием в медицинском сообществе. В Российской Федерации и странах СНГ препараты представлены марками софосбувир, даклатасвир и ледипасвир. В настоящий момент на рынке появилось очень много подделок. Лекарства надлежащего качества можно приобрести только у компаний, имеющих лицензии и соответствующую документацию.

    Диагностика вирусных гепатитов методами ИФА и ПЦР

    Для подтверждения у пациента диагноза «вирусный гепатит» результаты исследований при помощи ИФА и ПЦР играют ведущую роль. Посредством ПЦР в крови пациента выявляется генетический материал вируса, что дает возможность не только подтвердить диагноз, но и выявить количество вируса, и определить стадию самого инфекционного процесса. С помощью ИФА-диагностики выявляются антитела к вирусам гепатитов.

    Диагноз гепатита А врач первоначально ставит после опроса больного, по жалобам, свидетельствующим об остром начале заболевания: сильная тошнота и рвота, боль в животе, развитие желтухи. В фекалиях больного, если они собраны в острой стадии заболевания, можно обнаружить вирус.

    При исследовании крови больного на ИФА в острой фазе заболевания будет значительно повышен уровень IgM, а титр IgG останется на высоком уровне даже после выздоровления пациента. Специфические антитела выявляются уже на 3 день острой фазы заболевания и могут сохраняться до полугода. Все современные тест-системы диагностики гепатита А основаны именно на методе ИФА.

    Для диагностики вирусного гепатита В врачи стараются использовать как метод ИФА, так и метод ПЦР. Высокий уровень титров IgM и IgG говорит о высокой активности вируса, что характерно для недавнего по времени заражения. К ПЦР диагностике в данном случае обращаются для того, чтобы выявить степень концентрации вируса.

    Также оба метода используют при подозрении на гепатит С. Антитела титра IgM будут обнаружены примерно через 8 недель после заражения, титр IgG появится через 12 недель. С помощью ПЦР диагностики врач точно определит стадию инфекционного процесса, количество и качество самого вируса. Также можно определить генотип вируса гепатита С.

    Дело в том, что на сегодняшний момент науке известно 11 видов этого вируса. В России наиболее распространены 3 генотипа. Если врач точно знает, каким именно генотипом заражен пациент, то лечение будет направлено именно на борьбу с конкретным генотипом. Все препараты и дозы будут правильно подобраны и шансы на успех, таким образом, значительно возрастут.

    Несмотря на то, что метод ИФА был изобретен достаточно давно (впервые такой анализ был проведен в 1971 году), его актуальность не потеряла своего значения и сегодня.

    Следует помнить, что необходимость проведения подобной диагностики может установить только врач. И только квалифицированный медицинский работник может правильно интерпретировать результаты анализа и назначить соответствующее лечение. Ни в коем случае не занимайтесь самодиагностикой и тем более самолечением.

    Источник: http://vsepropechen.ru/bolezni/gepatit/terapiya-02/ifa-na-gepatit.html

    Методы ИФА и иммунблотинга в диагностике гепатитов

    Констатация HCV-инфекции базируется на выявлении специфических серологических маркеров. Это важно не только для дифференциальной диагностики гепатита С, но и для суждения о стадии заболевания, прогнозировании его течения, оценки активности процесса и эффективности противовирусной терапии.

    Наиболее широко практикуется определение антиHCV антител. Принципиальное значение имеет генодиагностика, основанная на детекции РНК HCV. Недавно появилась возможность обнаружения циркулирующих HCV антигенов.

    Метод ИФА

    Выявление антиHCV антител проводят при помощи твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) на основе комплекса структурных и неструктурных вирусных пептидов. В настоящее время применяются диагностические системы 3го поколения, которые построены из рекомбинантных и/или синтетических фрагментов структурных и неструктурных HCVбелков (С, NS3, NS4 и NS5). Внедрение диагностикумов 3-го поколения позволило сократить сроки первичного выявления антиHCV при острой инфекции, существенно повысить чувствительность и специфичность реакции (рис 1).

    Рис.1 Детекция маркеров HCV тестами разных поколений

    Частота выявления анти-HCV среди РНК HCV позитивных образцов крови приближается к 100 %. На фоне хронической инфекции антитела выявляются постоянно, а после элиминации вируса сохраняются (прежде всего, анти-С) в течение 48 и более лет. Поэтому формальное наличие анти HCV не всегда говорит о присутствии вируса в организме и не позволяет судить об активности процесса. Для суждения о вирусной нагрузке, активности HCV репликации, риска хронизации, разграничения острого и хронического гепатита, длительности инфекционного процесса и степени поражения печени предложено использовать определение спектра антител к различным HCV пептидам, а также наблюдать за их качественной и количественной динамикой. Это дает ориентировочную информацию, которая требует подтверждения другими методами.

    Детекция антител к каждому из HCV антигенов имеет самостоятельное диагностическое значение. Так например известно, что анти core, анти Е и анти NS3 выявляются на самых ранних этапах сероконверсии, анти NS4 и анти NS5, как правило, появляются позднее. По мере развития инфекционного процесса титры выявляемых анти HCV увеличиваются.

    Было показано, что наличие в сыворотке анти HCV core является достаточно надежным маркером вирусной репликации, поскольку имеются данные о том, что их присутствие коррелирует с наличием в сыворотке специфической м РНК.

    Анти НCV core тест может использоваться в качестве подтверждающего теста при тестировании образцов с «неопределенными» результатами. Сыворотки крови, в которых анти НCV core детектируется в разведении 1:1000 с большой вероятностью содержат вирус и являются реально позитивными. Образцы, являющиеся позитивными в разведении 1:200 и отрицательными в разведении 1:1000, необходимо в дальнейшем исследовать на наличие вирусной РНК. С большой вероятность эти сыворотки можно отнести к реально негативным. Таким образом, используя предварительный анти HCV core тест можно существенно снизить количество образцов, требующих подтверждения методом ПЦР.

    Есть данные, что у беременных женщин (4 неделя беременности и выше) может быть ложноположительный тест на анти HCV core.

    Анти NS3 могут являться самостоятельным диагностическим маркёром острой НCV инфекции. Высокие титры анти NS3 при остром гепатите С свидетельствуют о значительной вирусной нагрузке, а длительное сохранение их в острой фазе связано с высоким риском хронизации инфекционного процесса.

    Выявление анти NS4 и высокие титры этих антител чаще всего свидетельствуют о длительности инфекционного процесса, и, по всей видимости, коррелируют со степенью поражения печени.

    Имеются данные, говорящие о том, что выявление антитNS5 в высоких титрах часто свидетельствует о присутствии вирусной РНК, а в острой стадии является предиктором хронизации инфекционного процесса. Также имеются данные о том, что в NS5 области вируса гепатита С имеются последовательности, неспецифически реагирующие с антителами в сыворотках крови человека. При помощи синтетических пептидов было проведено эпитопное картирование этой области, и были найдены последовательности, специфически реагирующие с антителами, вырабатываемыми именно к вирусу гепатита С.

    Большое значение для клинической практики может иметь выявление анти Е1/Е2. Выявление анти Е в течение 1 месяца от начала заболевания и быстрое последующее снижение может свидетельствовать об очищении организма от вирусной РНК, определение анти Е при хроническом гепатите С свидетельствует об активной вирусной репликации.

    Для многих вирусных заболеваний, таких как гепатит В, гепатит Д, гепатит А, определение антител класса IgM к различным вирусным маркерам является важным диагностическим показателем острой или хронической инфекции. Важность определения антител этого класса при инфекции вируса гепатита С остается не вполне ясной. Разными авторами получены противоречащие друг другу результаты. Вопреки ожиданиям IgM ответ в острой фазе гепатита С не следует классическому пути антителообразования: IgM анти HCV могут выявляться одновременно и даже позднее, чем анти HCV класса IgG. Поэтому обнаружение IgM анти HCV не может быть использовано как маркер острой HCV инфекции. Вместе с тем длительность циркуляции антикор IgM (35 месяцев) является фактором, прогнозирующим персистентную инфекцию, а их появление при хроническом гепатите С свидетельствует о реактивации вируса, т.е. об обострении процесса. Этому соответствует корреляция между темпами снижения антикор IgM и эффективностью противовирусной терапии.

    Иммунблотинг

    Иммунблотинг (англ. «blot» пятно) основан на дифференцированном определении антител к различным антигенам (С, NS3, NS4 и NS5), которые в виде дискретных фракций («пятен») фиксируются на нитроцеллюлозных полосках и после инкубации с исследуемой сывороткой проявляются мечеными антителами так же, как в «обычном» ИФА. Результат считается положительным при выявлении антител к двум и более антигенам.

    Несмотря на высокую специфичность, современные ИФА-системы не гарантированы от гипердиагностики, т.е. от ложноположительных результатов. Для их исключения также требуется динамическая оценка на основе индикации анти HCV к дискретным антигенам (подтверждающие, или конфирмативные тесты).

    Наряду с ложноположительными возможны и ложноотрицательные результаты, когда анти HCV антитела не удается обнаружить несмотря на присутствие вируса в организме. Известны по меньшей мере три подобных ситуации:

    1) начальный период заболевания (серонегативная фаза острого гепатита фаза «окна»),

    2) больные, получающие иммунодепрессанты (они могут быть длительно инфицированы без сероконверсии),

    3) заражение некоторыми HCV генотипами (прежде всего 3 и 4).

    В настоящее время коммерческие тесты для выявления антител к вирусу гепатита С используют в качестве антигенов рекомбинантные белки или синтетические пептиды, созданные на основе аминокислотной последовательности вируса гепатита C 1-го генотипа. Однако, растет число наблюдений, что такие тесты могут быть недостаточно эффективны для надежной детекции антител при инфицировании вирусом другого генотипа. Так, например, было показано, что антигены, полученные из NS3 области HCV 1-го генотипа, в 5 раз более эффективно узнают антитела в сыворотках больных, инфицированных вирусом HCV 1го генотипа, чем в сыворотках больных, инфицированных вирусом 2го или 3го генотипа. Исследования, проведенные L Bassit (2002) продемонстрировали неспособность нескольких коммерческих тестов адекватно детектировать антитела к вирусу гепатита С у больных, инфицированных вирусом 1а и 3а типов. Это наблюдение имеет огромное значение как для регионов, где превалируют вирусы других типов, так и для отдельных популяций.

    Таким образом, для эффективной диагностики гепатита С необходим высокочувствительный тест, способный адекватно реагировать с анти-ВГС любого генотипа.

    Кроме прямого изучения структуры РНК, информация о зараженности конкретным генотипом может быть получена на основе изучения антител против генотипоспецифических эпитопов, локализованных в NS5, NS4 и С белках вируса. Перечень серотипируемых вариантов HCV в настоящее время включает генотипы (субтипы) 1a, 1b, 2a, 2b, 3a и 4а. Результаты серотипирования и РНК-типирования совпадают в 50-95% случаев, в зависимости от генотипа. Осуществляется коммерческий выпуск диагностических препаратов для серотипирования в планшетном варианте ИФА и иммуноблоте.

    Источник: http://www.hv-info.ru/info/statyi/gepatit-s/440-ifa.html

    Метод ИФА в обнаружении гепатитов

    Современной медицине известно множество заболеваний печени. В число наиболее распространенных и опасных входит ВГС (вирусный гепатит С), поскольку эта инфекция часто развивается бессимптомно и приводит к критическим осложнениям, вплоть до летального исхода. Именно поэтому первостепенное значение имеет своевременная диагностика заболевания, осуществляемая при помощи различных методов, в том числе иммуноферментного анализа (ИФА) для выявления в крови антител к вирусу.

    Констатация HCV-инфекции для диагностики гепатита

    В лабораторной диагностике для выявления гепатита С (HCV-инфекции) используют два типа методов:

    1. Серологический, основанный на выявлении антител к вирусу гепатита С (анти-HCV), также называется ИФА (иммуноферментный анализ). Он направлен на обнаружение анти-HCV (маркеров IgM и IgG) применяется и для скрининга, и для диагностики гепатита С. Оба этих маркера могут обнаруживаться в крови (плазме) в разных сочетаниях, что требует правильной клинической интерпретации. Для подтверждения наличия анти-HCV проводится тест RIBA (рекомбинантный иммуноблот).
    2. Молекулярно-биологический, направленный на обнаружение РНК вируса. Тест на РНК HCV-инфекции назначают следующим категориям пациентов:
      • с выявленными анти-HCV;
      • без обнаруженных анти-HCV, но с установленными эпидемиологическими и клиническими данными, требующими исключение острой формы ВГС.

    РНК вируса можно выявить в крови уже через 14 дней после инфицирования, то есть до появления анти-НСV, возникающих в течение первых 2-3 месяцев.

    Для окончательного подтверждения диагноза (особенно при выявлении лишь одного из двух маркеров HCV-инфекции) специалисты рекомендуют провести через определенное время повторные тесты анти-HCV и РНК HCV.

    Выявление гепатита методом ИФА

    Для осуществления ранней диагностики вирусных гепатитов, особенно бессимптомных, безжелтушных форм, в сыворотке крови выявляют наличие вирусных белков (антигенов) или антител к ним (вырабатываются иммунной системой при проникновении в организм вирусов) посредством иммуноферментного анализа (ИФА). Это универсальный метод иммунологической диагностики, его суть заключается в исследовании взаимодействия «антиген-антитело». Широко применяется во многих странах мира.

    Определение гепатита методом ИФА позволяет не только установить точный диагноз, но и оценить характер заболевания, а также выбрать грамотное и эффективное лечение посредством традиционных лекарственных средств (интерферон, рибавирин), препаратов прямого действия (Софосбувир, Даклатасвир) и их дженериков индийского и китайского производства.

    По возможности диагностика вирусного гепатита методом ИФА дополняется ПЦР (полимеразной цепной реакцией), позволяющей определить присутствие в крови РНК вирусов гепатитов.

    Насколько точен метод иммуноферментного анализа

    По оценкам специалистов, точность метода ИФА составляет 95%, то есть у 95 из 100 пациентов при помощи иммуноферментного анализа можно выявить в крови наличие и количество антител ВГС – IgM и IgG. Если результат положительный, можно диагностировать контакт HCV с организмом (не сам вирус, а именно присутствие в крови антител к нему, что может быть результатом уже перенесенного заболевания).

    Однако несмотря на высокую чувствительность метода иммуноферментного анализа (ИФА), у 40% пациентов с положительным результатом вирус может быть не обнаружен, что говорит о сомнительном или ложноположительном результате.

    Чтобы подтвердить корректность результатов ИФА, для более точного исследования обнаружения антител к ВГС применяется метод RIBA (рекомбинантного иммуноблоттинга).

    Анти НCV core тест

    В число эффективных исследований для определения наличия антител к вирусам гепатитов входит анти HCV core, используемый как подтверждающий тест при получении «неопределенных» результатов.

    Если в сыворотке крови анти НCV core обнаруживается в разведении 1:1000, с большой вероятностью можно диагностировать положительный результат, то есть заболевание присутствует.

    Если же образцы при разведении 1:1000 отрицательные, в разведении 1:200 позитивные, необходимо исследование на наличие вирусной РНК. В этом случае, скорее всего, HCV-инфекции нет.

    Важно понимать, что при хронических формах ВГС антитела выявляются постоянно, а при элиминации (выведении из клеток организма) вируса сохраняются на протяжении 4-8 и более лет. Потому наличие анти-HCV не всегда свидетельствует об инфицировании организма и не позволяет делать объективные выводы об активности процесса.Для получения точных данных о вирусной нагрузке, степени поражения печени, длительности инфицирования и различия острой и хронической форм заболевания рекомендуется использовать определение спектра антител к разным HCV пептидам. Также важно пронаблюдать их количественную и качественную динамику.

    Источник: http://india-expres.com/stati/metod-ifa-v-obnaruzhenii-gepatitov

    Ифа или пцр при гепатите с

    Чем отличается анализ ифа от пцр

    Появление большого количества заболеваний, в том числе иммунных и инфекционных, спровоцировало появление огромного количества тестов для их выявления. Больше всего успехов наблюдается в молекулярной биологии. Именно к этой отрасли и относятся анализы ИФА и ПЦР.

    Для того чтобы выяснить отличия между ПЦР и ИФА, а также их сходства, необходимо рассмотреть в отдельности каждое обследование.

    Методика обнаружения ИФА

    ИФА #8212; это иммуноферментный анализ, который проводится в лаборатории и основан на избирательной реакции специфических иммунологических реакций в паре антиген-антитело.

    Для того чтобы провести ИФА-диагностику, необходимо сдать кровь, над которой проведут исследования и смогут выяснить, есть ли в организме возбудители инфекций.

    Наиболее часто встречающиеся инфекции можно представить в виде списка, в который входят в основном половые заболевания:

    • сифилис;
    • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
    • гепатит;
    • хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз;
    • инфекция цитомегаловируса;
    • герпес.

    Кроме того, по результатам ИФА возможно определить и другие инфекционные заболевания, уровень гормонов, антител и даже начальные стадии онкозаболеваний.

    Главное, чем отличается ИФА от ПЦР заключается в том, что результаты метода ИФА нельзя использовать как первичные данные. Перед выяснением инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, и уровня антител в крови стоит провести анализ ПЦР.

    Как исключение, можно назвать только анализ на сифилис, но и здесь нужно проводить метод ИФА в комплексе с микропреципитацией.

    Также ИФА отличается тем, что даже если по результатам найдены антитела в организме человека, то нельзя однозначно сказать, что человек болен, так как их наличие может говорить только о контакте с возбудителем в недавнем времени (иногда в далеком прошлом).

    Даже, несмотря на то что метод ИФА не очень достоверный, есть вероятность, что ряд заболеваний не выяснит и ПЦР. К таким заболеваниям относят незаметные для иммунной системы человека болезни, например, уреаплазмоз, микоплазмоз или трихомонада.

    Метод обнаружения ПЦР

    ПЦР #8212; это полимеразная цепная реакция, которая относится к методам молекулярной диагностики и так называемого золотого стандарта. Именно этот метод является наиболее точным в определении иммунных заболеваний, передающихся половым путем. А является он настолько действенным благодаря проверке временем и многоразовым тщательным клиническим апробированиям, обследованию не одной тысячи людей.

    Важным отличием является то, что для изучения ПЦР используется клинический материал больного или материал, полученный из внешней среды, которой является вода или почва.

    Метод ПЦР лучше тем, что даже если в пробе есть несколько молекул ДНК, которые принадлежали возбудителю инфекции, как результат все равно будет найдено заболевание.

    Еще одной особенностью этого метода считается и то, что можно определить и медленно развивающиеся заболевания. Кроме того, не нужно использовать трудоемкие микробиологические методы.

    Наиболее часто при помощи ПЦР определяются гинекологические, урологические заболевания, такие как:

    • урогенитальные инфекции, которые передаются половым путем;
    • гепатит;
    • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
    • папилломы;
    • туберкулез;
    • хеликобактериоз;
    • сальмонеллез;
    • дифтерия.

    Хоть и полагают, что метод ПЦР дает наиболее точные данные обследования, но это касается только той части материала (ткани), клеточный материал которого берется на обследование. Таким образом, даже в этом методе возникают погрешности и затруднения в диагнозе, которые связаны со скоростью распространения болезни.

    Как пример можно привести наличие хламидий в канале шейке матки, но их отсутствие в маточных трубах, ткани яичников и т. д.

    Результат рассмотрения ПЦР или ИФА

    Главное отличие между ПЦР и ИФА заключается в оборудовании для проверки и используемом материале. Из-за этого и может возникнуть ситуация, в которой ИФА-тест будет положительным, а ПЦР-тест отрицательным или наоборот.

    Например, взяли ПЦР из области предполагаемой инфекции, а ИФА в любом другом месте организма (поскольку для этого теста нет разницы в месте, так как антитела есть везде, а ИФА реагирует именно на них). Далее проводят тест, и результат ПЦР показывает, что заболевания нет, а ИФА дает положительный ответ. Это будет обозначать, что вирус в организме есть, но не конкретно в той части ткани, которую исследовали при методе ПЦР.

    Таким образом, важно запомнить то, что выбирать лучшее между ПЦР или ИФА не стоит, а стоит делать совместно два теста и получать 100% результат.

    Также можно отметить, что ПЦР #8212; это достоверная информация о зараженном (инфицированном) участке (конкретной ткани), которая получена благодаря высокой чувствительности. А ИФА #8212; косвенный метод получения информации о состоянии всего организма и наличия в нем инфекции, а еще о процессе инфицирования вовлеченных тканей и органов, которые не подлежат прямой диагностике. Кроме видимых расхождений, есть и кое-что общее в этих двух методах. Например, высокая скорость получения результата и универсальность, результаты которых можно проверить уже через 4 или 5 часов.

    Более подробную информацию о том, чем отличается обследование ИФА от ПЦР, какой метод лучше для человека и его организма, в частности, или конкретно для его заболевания, выбирает доктор. Так что лучше обратиться к врачу за направлением на проведение анализа, чем заниматься самолечением, поскольку иногда даже личное желание провериться чаще чем нужно приводит к неожиданным последствиям, ведь каждый анализ крови и тканей несет за собой последствия и если переусердствовать, то они будут непредвиденными.

    Возможно Вас заинтересуют Реклама на сайте ✆

    Расшифровка анализа на гепатит С

    Гепатит С в хронической или острой фазе представляет собой одно из самых часто диагностируемых заболеваний печени, возникающее в результате заражения вирусом гепатита С (HCV), который попадает в организм в основном с кровью инфицированного человека.

    Более чем у 70% больных острым гепатитом С практически отсутствуют какие-либо признаки болезни. Только в редких случаях после заражения могут встречаться такие проявления заболевания, как желтуха, тошнота, изменение цвета мочи и кала, рвота, потеря аппетита, усталость, боли в животе. Обычно симптомы возникают спустя 45 дней после инфицирования, однако, этот срок может варьироваться от 15 до 180 дней. При проявлении подобных симптомов нужно обязательно обратиться в больницу для прохождения анализа крови на гепатит С.

    Своевременно проведенная диагностика предоставляет возможность обнаружить заболевание на ранней стадии, что намного повышает шансы на выздоровление.

    Какие же следует сдать анализы для этого? Какова их норма? И каким врачом будет произведена их расшифровка и вынесен точный диагноз?

    Условия назначения анализов

    Обязательная сдача анализа на гепатит С – норма для:

    1. Женщин в период планирования и вынашивания беременности;
    2. Пациентов с симптомами хронического или острого гепатита;
    3. Людей, находящихся в группе риска, в том числе:
      • медицинских работников;
      • сотрудников правоохранительных органов;
      • наркоманов;
      • больных СПИДом.

    Анализы и подготовка к ним

    Особой подготовки к сдаче анализа на гепатит С не требуется. Забор крови производится натощак из вены спустя не менее 10 часов после еды.

    Норма, регламентирующая сроки выполнения исследования, составляет не более 2 суток.

    Анализы ИФА на гепатит С

    Первоначально назначаемый для диагностики заболевания анализ – это ИФА тест, или иммуноферментный анализ, который позволяет выявить в крови наличие и количество специфических антител Anti-HCV в 95% случаев. Данные антитела бывают 2 видов – IgM и IgG. В случае если результат положительный, это свидетельствует о наличии контакта организма с HCV. Однако у 40% людей с положительным ИФА в крови вируса не обнаруживается – это сомнительный, или ложноположительный, результат.

    Анализы RIBA на гепатит С

    Чтобы подтвердить положительные результаты ИФА, используется метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA), который представляет собой более точное исследование наличия антител к вирусу гепатита С. Однако положительный результат также не определяет наличие HCV в организме пациента, а лишь подтверждает присутствие в нем антител.

    Анализы ПЦР на гепатит С

    Анализ РНК HCV, часто называемый анализом полимеразной цепной реакции, или ПЦР – более точный метод исследования крови, позволяющий обнаружить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус представляет собой одну частицу РНК). Анализ ПЦР на гепатит С выявляет его до возникновения антител в сроки, не превышающие пяти суток после заражения.

    Современная медицина использует следующие вариации анализа ПЦР:

    • Количественный ПЦР, который определяет не только сам факт присутствия вируса, но и его количество.
    • Генотипирование, позволяющее установить генотип вируса гепатита С, что дает возможность определить, какие методы терапии необходимо применить в каждом конкретном случае.

    Существует более 10 генотипов HCV, однако для клинической практики достаточно определения 5 наиболее распространенных из них.

    Рассмотрим подробнее количественный и качественный анализы на РНК HCV.

    Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Это довольно сомнительный анализ, поскольку у него есть предел границы чувствительности. При проведении качественного ПЦР желательно использовать для диагностики систему, норма чувствительности которой составляет не ниже 50 международных единицах на мл (МЕ/мл). Референсное значение, или норма – отрицательный результат («не обнаружено»), который говорит о том, что в анализируемом образце не выявлены специфичные для HCV фрагменты РНК. Положительный результат ПЦР («обнаружено») означает наличие активной инфекции.

    Количественный анализ ПЦР, или вирусная нагрузка, представляет собой тест на концентрацию вируса (виремию) в крови, который показывает количество единиц вирусной РНК в определенном объеме крови.

    1. Более 800 МЕ/мл – норма высокой вирусной нагрузки;
    2. Менее 800 МЕ/мл – норма низкой вирусной нагрузки.
    3. Количественный анализ ПЦР нужно проводить, если:
    4. Качественный тест на наличие в сыворотке РНК вируса гепатита С имеет положительные результаты;
    5. Определяется тактика и оценка эффективности терапии больного.

    Количественный показатель вируса в крови и тяжесть заболевания не имеют между собой прямой зависимости.

    Концентрация вируса влияет на:

    • инфекционность болезни, что предполагает более высокий риск передачи вируса при большем содержании его в крови больного;
    • эффективность проведения терапии, которая тем выше, чем ниже вирусная нагрузка.

    Анализ генотипирования делается при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С, а также для:

    1. Определения прогрессирования заболевания;
    2. Выработки тактики лечения;
    3. Оценивания эффективности терапии;
    4. Прогнозирования хронизации протекающего инфекционного процесса.

    Продолжительность лечения, зависящая от выявления генотипа вируса, является важным фактором, поскольку применяемые для лечения препараты имеют целый ряд побочных эффектов и плохо переносится больными.

    Расшифровка анализа на гепатит С

    Расшифровка тестов проводится квалифицированным специалистом. Норма предполагает полное отсутствие РНК вируса, антител к ним и антигенов. Содержание антител в крови может указывать как на наличие острого или хронического гепатита С, так и на протекание периода выздоровления. Наличие в крови RNA HCV, выявленное при ПЦР, свидетельствует о присутствии в крови вируса.

    При нарушениях забора и транспортировки крови, а также техники выполнения исследования анализ ПЦР иногда показывает ложноположительный, или сомнительный, результат. Анализы RIBA и ИФА могут показывать ложноположительные результаты в случае ранней стадии заболевания, когда организму еще не удалось выработать достаточного количества антител.

    Если расшифровка тестов на гепатит С показывает положительные результаты, пациенту необходимо обратиться к гепатологу и врачу-инфекционисту, которые подскажут, какие дополнительные анализы нужно сдать для дальнейшего диагностического обследования и лечения.

    Медицинская статистика свидетельствует, что в настоящее время около 4% населения планеты инфицировано вирусом гепатита С. Однако эта цифра не отражает объективной реальности, ведь многие люди даже не догадываются о том, что являются носителем данного вируса. Вот почему так важно регулярно проводить обследование у врача и периодически делать анализ крови на гепатит. Каждый в отдельности тест может давать сомнительный результат, и только в комплексе они позволяют окончательно определиться с диагнозом и начать адекватно лечить гепатит.

    Автор. Загороднюк Михаил Петрович,

    специально для сайта moizhivot.ru

    Гастроэнтерологи в вашем городе

    О гепатите С

    О гепатите С и методах лечения в странах СНГ.

    В настоящее время признанным в мире и самым оптимальным по сочетанию цена-эффективность методом лечения является комбинированная терапия с использованием препаратов интерферона и рибавирина. Эффективность такой терапии примерно от 40% до 85%. Эффективность терапии зависит от: генотипа вируса, генотипа больного, веса, пола, возраста, давности инфицирования, применяемых препаратов и др.

    Новые методы лечения дженериками Софосбувир. Асунапревир. Даклатасвир дает эффективность до 100%.

    О Гепатите С — обычно он вызывается вирусом, попавшим в организм с половым контактом или кровью зараженного человека.

    Заболевание протекает в двух вариантах — если вирус активно размножается, он при этом повреждает клетки печени,а печень не успевает восстановится (регенерировать). т.к. скорость повреждения выше скорости восстановления,при этом клетки замещаются рубцами, страдают функции печени. Если репликация (размножение вируса) медленное, печень успевает регенерировать.

    Анализы

    При заболевании необходимо контролировать Трансаминазы- маркеры повреждения гепатоцитов. ALT (АЛТ, АлАТ), AST (АСТ, АсАТ)- катализируемые ими реакции осуществляют связь между белковым и углеводным обменом. Не понятно что побуждает перейти гепатиту С из вялотекущей в активную форму, которая является смертельно опасной и полностью разрушает печень залет. Поэтому считается, что опасность представляет именно гепатит, который протекает с повышением трансаминаз

    Пациентам с положительным анализом крови на наличие РНК (Рибонуклеиновые кислоты) вируса гепатита С в крови методом Полимеразной цепной реакции (ПЦР. PCR) и Иммуноферментным анализом, ИФА (Enzyme immunoassay) необходимо контролировать активность вирура по уровню АЛТ (Аланин — аминотрансфераза). АЛТ считается индикаторным ферментом, и к его определению постоянно ссылаются при постановке диагноза различных гепатитов.

    Если уровень АЛТ в пределах нормы, то противовирусная терапия обычно не рекомендуется.

    Необходимо повторять биохимический анализ крови один раз в 3-6 месяцев. А также регулярное обследование состояния печени. Рекомендуется биопсия печени (извлечение фрагмента-биоптата печеночной ткани) которая покажет полную картину в печени на текущий день, а также поможет определить стадию развития фиброза (рубцевания) печени. Также возможно проведение других анализов на фиброз, или применение неинвазивного метода эластографии печени с аппаратом Фиброскан.

    Различают 5 стадий (от 0 до 4) развития поражения печени (стадий фиброза печени). последней стадией является цирроз печени (сильное поражение печени, при котором она утрачивает свои функции). По этим обследованиям и результатам анализов принимается решение о необходимости лечения.

    Для стадий 0-1 лечение не обязательно. Возможно начало лечения при персональной рекомендации врача при внепеченочных проявлениях вируса.

    Для стадий 2 и выше рекомендуется безотлагательно начинать терапию.

    В любом случае, даже при откладывании лечения необходимо пациенту находиться под контролем гепатолога. Один раз в полгода проводить тесты на трансаминазы, один раз в 3-4 года контролировать стадию развития фиброза печени.

    ИТОГО: АЛТ + ИФА + ПЦР — для диагностики гепатита С. К лечению вируса гепатита С мы обычно переходим при повышенной АЛТ, положительном ПЦР анализе и наличии маркеров ИФА. Лечение начинается после:

    • получения ИФА-маркеров (когда выявлены антитела к вирусу гепатита С)
    • методом ПЦР в крови выявлено наличие РНК вируса гепатита С

    Желательно это сделать в двух разных лабораториях.

    Гепатита С без ИФА маркеров не бывает! Но они появляются по завершении, инкубационного периода, и сохраняются в дальнейшем вне зависимости от результатов лечения. Обычно, после срока инкубационного периода, если нет маркеров — нет гепатита!

    Внимание. По последним исследованиям, если говорить о гепатите С у коинфицированных ВИЧ / ВГС могут отсутствовать антитела к вирусу. Соответственно ИФА маркеры отсутствуют, а вирус гепатита С есть, который подтверждается положительным результатом при анализе методом ПЦР.

    Метод ПЦР- Полуколичественный анализ крови для прогноза гепатита С — это уже устаревший вид анализа, дающий очень расплывчатый результат. Лучше используйте количественный анализ крови методом ПЦР для определения вирусной нагрузки.

    Качественный ПЦР анализ может быть только либо положительным, либо отрицательным (анализ, котторый устанавливает факт наличия РНК вируса гепатита С). «полуположительный и полуотрицательный», не имеет никакого смысла.

    Активность гепатита и внепеченочные проявления

    Смотрим на результаты биохимического анализа крови и трансаминазы. Но надо учитывать, что эти показатели, по оценке активности гепатита С, имеют погрешность около 20%.

    Самую точную картину сможет дать биопсия печени. Но это тяжело и она доступна не везде. Также сужествуют другие методы обследования, они менее точные, но безболезненные, например фибросканирование (эластометрия) печени и фибротест.

    Внепеченочные проявления — результаты исследований с участием мед.работников, с гепатитом С, показали, что 74% больных испытывали различные формы. Наиболее часто наблюдались боли в суставах -74%; нечувствительность или покалывание — 17%; боли в мышцах – 15%; нестерпимый зуд — 15%; сухость слизистых рта и глаз – 11%.

    Схемы лечения (выбор препаратов, дозировка и частота приема) подбирается в соответствии с генотипом вируса гепатита С. Сейчас существует 6 основных генотипов вируса, которые дают более детальную информацию о гепатите С (обозначаемых цифрами: 1,2,3,4,5,6), а также обозначаются подтипы/субтипы ( которые обозначаются латинскими буквами, присоединенными к цифре генотипа: 1b, 3a,…). Вирусы с разными генотипами-субтипами отличаются по чувствительности к терапии интерфероном, по содержанию вируса в крови (виремии ), по распространению в теле.

    Генотипирование диктует длительность терапии и ее интенсивность.

    Первый и четвертый генотип ( которые встречающийся редко), примерно вдвое устойчивее при антивирусной терапии. Подтип генотипа вируса — при этом не существенен.

    Количественная оценка вирусной нагрузки (наличие вируса) — относительно новое понятие,введеное европейскими гепатологами. Суть сравнения показателей вирусной нагрузки до лечения и через 4, 8, 12 недель терапии, соответственно, это сравнение позволяет уточнять схему терапии, а также рекомендовать отмену или продолжение терапии (при снижении загрузки в 100 и более раз) с большой вероятностью на успех.

    Плюс такой оценки — если терапия не работает пациент узнает об этом быстро.

    Минусы- нужны качественные и постоянные анализы.

    Это все относится к стандартной интерфероновой терапии.

    Контрацепция в период терапии, а также в течение 6 месяцев после окончания терапии обязательна для обоих партнеров.

    Источник: http://www.izlechisebya.ru/gepatit/ifa-ili-pcr-pri-gepatite-s.html